基因编辑的未来遭质疑，因严重安全问题，FDA延后基于基因编辑的CAR-T临床试验！

自2012年孕育出以来，由病菌/古菌的强攻系统改造而来的CRISPR等位基因校对系统设计就吸纳了全都全都球开放性科学家的目光，在CRISPR系统设计的鼓励下，人们得以较慢得心应手地操纵等位基因、彻底改变生命。摆脱基因突变、攻取肝癌...这些曾经遥不可及的梦想从此变得触手可及。

2020年10月初，CRISPR等位基因校对踏入高光天都，这一系统设计孕育出仅8年就赢取了迪贝尔奖的肯定。以后，CRISPR等位基因校对在医学治疗法上拿下一系列先行者进展，尤其是2021年6月初《弗吉尼亚州医学期刊》NEJM 出版了全都球开放性首个体液CRISPR等位基因校对治疗法的医学结果【1】。迪奖得主詹妮弗·杜德娜（Jennifer Doudna）创办者的 Intellia Therapeutics 研发的治疗法转荷尔蒙酶淀粉样变开放性（ATTR）的CRISPR等位基因校对治疗法，在6名病变的医学之前公共安全都理论上。这也让全都全都球开放性看到了CRISPR等位基因校对系统设计在治疗法基因突变的强盛威力和发展前景。

随着CRISPR系统设计在基因突变运用领域一路大放异彩，越来越多的科学家和医药该公司开始探索CRISPR在肝癌治疗法运用领域的运用。

早于在2016年6月初，南京大学华西养老院的卢名誉教授开始完成CRISPR等位基因校对T肝细胞治疗法肝癌的1期医学，于2016年10月初28日完成了全都球开放性尚未有等位基因校对肝细胞体液药剂。该数据分析也于2020年4月初28日出版于国际顶尖医学期刊 Nature Medicine 【2】。这项1期医学声称了CRISPR等位基因校对非小肝细胞膀胱癌病变的T肝细胞的PD-1等位基因完成肝癌治疗法的可靠开放性和可行开放性。

我们都告诉他，CAR-T肝细胞治疗法是肝癌治疗法没用，在多种血液类肝癌之前显露出了让人印象动人的强盛功效。然而，这种提取病变自身T肝细胞并完成改造的肝细胞治疗法由于十分复杂的流程和相对于定制转化，所致价位及其太高，数十万美元的成交不小地限制了CAR-T治疗法的运用。

为了解决CAR-T治疗法的这些缺陷，许多科学家和医药该公司开始研发基于CRISPR等位基因校对的股票交易型CAR-T治疗法（off-the-shelf CAR-T），通过CRISPR等位基因校对系统设计改造T肝细胞，有望实现让肝细胞治疗法从一个内皮移植的十分复杂治疗法变为一个当是移植的药物。

在这方面，Allogene Therapeutics 和迪奖得主 Jennifer Doudna 创办者的 Caribou Biosciences 工业发展极其促使，这两家该公司已经港交所，且之外已开展无关医学。

然而，最近一名基因突变病变在拒绝接受 Allogene 该公司的经过等位基因校对的抗击CD19 CAR-T候选药物ALLO-501A治疗法后，他的所有白肝细胞系都增加了，活检分析辨认出他的体液消失了带有等位基因诱发的抗击CD19 CAR-T肝细胞。

由于等位基因诱发可能会所致肝癌愈演愈烈，考虑到这种致使的潜在不确定开放性，FDA暂停了Allogene 该公司的所有CAR-T医学。受此通告负面影响，Allogene 该公司股票上涨46%。

Allogene 该公司股票上涨46%

波及整个运用领域

到目前为止为止，这些肝细胞为何会消失等位基因诱发一直并不告诉他，可能会在等位基因校对过程之前或在肝细胞较慢缩减到时消失了等位基因诱发。Allogene 该公司的这项医学是使用是TALEN校对系统设计对T肝细胞完成等位基因校对，不管是TALEN还是CRISPR，关的对等位基因上DNA完成改写的系统设计都会造成了这些缺陷，这也给股票交易型CAR-T治疗法整个运用领域造就了挫败。

不仅是 Allogene 该公司股票上涨，同样花钱股票交易型CAR-T治疗法的 Cellectis 该公司和 Caribou Biosciences 该公司股票也在此之后飙升。这也潜在不确定开放性也让人们对等位基因校对的今后显现出了忧心，几家港交所的CRISPR等位基因校对该公司股票也开始上涨。

Cellectis 该公司股票上涨24%

Caribou Biosciences 该公司股票上涨15%

Intellia Therapeutics该公司股票上涨10%

Editas Medicine股票上涨8%

CRISPR等位基因校对的潜在不确定开放性

CRISPR等位基因校对是一个壮丽的应用软件，然而，这个应用软件绝非完美，自孕育出时起，CRISPR就显现出着脱靶开放性的忧心。仅仅，随着等位基因校对系统设计的优转化，脱靶开放性已不是其造成了的远超过缺陷，而更多的不确定开放性各种因素逐渐开始渗透到。

2021年4月初12日，麻省理工学院该学院 Did Pellman 团队等在 Nature Genetics 期刊出版学术著作【3】。通过单肝细胞全都等位基因组分子生物学，辨认出CRISPR-Cas9等位基因校对会毁损肝细胞核结构，所致微核和等位基因桥的消失，终于所致等位基因碎片。这项数据分析表明，我们对CRISPR-Cas9等位基因校对系统设计的公共安全都不确定开放性及无关机制的认识仍有缺少，在CRISPR等位基因校对系统设计的可靠开放性评估上还需谨慎。

此前，有多项数据分析辨认出了CRISPR等位基因校对可能会存在的多种潜在不确定开放性。

2018年6月初12日，Nature Medicine 期刊背靠背出版两篇学术著作【4、5】，提到CRISPR-Cas9等位基因校对尽可能会激活p53引致的DNA挫伤，这意味着，长时间的p53等位基因会依赖性CRISPR-Cas9等位基因校对，也就是成功被校对的肝细胞的p53等位基因很可能会是或许的，肝细胞癌变不确定开放性减低，如果将通过CRISPR/Cas9等位基因校对的肝细胞用于治疗法，将会有潜在致癌开放性不确定开放性。

2018年8月初8日，Nature 的一篇学术著作提到【6】，CRISPR/Cas9等位基因校对后的小鼠幼体之前消失频繁的大量序列其会（千序列数量级）。

2019年1月初28日，Nature Medicine 的一篇学术著作则提到【7】，体液预先存在针对Cas9酶的免疫应答，这虽然不是公共安全都缺陷，但会负面影响CRISPR等位基因校对的。

这篇 Nature Genetics 的学术著作提到，CRISPR-Cas9等位基因校对过程之前带入的DNA双链断裂，可能会所致等位基因碎片，这是一种极具毁损开放性的等位基因组重排形式，可能会会进一步所致致癌相结合酶的消失或特定调控失调。

但目前为止所有CRISPR等位基因校对运用领域医学治疗法研发的该公司都还从未考虑这个缺陷。

Did Pellman 提到，目前为止数据分析的最多的治疗法镰状肝细胞病和地之前海贫血的CRISPR治疗法，是在体外通过CRISPR-Cas9等位基因校对CD34+造血干肝细胞，然后先回输到病变体液，他们估计回输的白肝细胞之前有上百万个肝细胞存在CRISPR-Cas9所致的微核，带有等位基因碎片的不确定开放性。

目前为止，前全都全都球开放性CRISPR-Cas9治疗法的人还多得多，随着CRISPR治疗法的普及，所致致使不良事件的等位基因毒开放性缺陷很可能会在此之后消失。当然，这些数据分析却是为了减缓CRISPR的工业发展，而是让人们告诉他和看重CRISPR等位基因校对存在的新潜在不确定开放性。

结语

等位基因校对在医学运用最基础性的促请就是准确开放性与可靠开放性。作为关的DNA侧重的遗传操作，等位基因校对的副作用对病人造成的挫伤毫无疑问是噩梦的，因此等位基因校对系统设计转入医学使用无需慎之又慎。

对于准确开放性来说，CRISPR等位基因校对系统设计自孕育出以来，脱靶效应始终令人忧心，脱靶开放性通常是由于对DNA的错误整块造成的，除了减低CRISPR系统依赖性剂的得心应手开放性以外，研发DNA整块活开放性剥夺的dCas9，以及不依赖DNA双链断裂的单序列校对器也极为重要的一段距离。

对于可靠开放性来说，体液对病菌来源的Cas9酶的免疫原开放性所谓转化学所谓应，CRISPR-Cas9激活p53引致的DNA挫伤，引致等位基因大片段其会，以及引致p53失活等位基因的石英砂等等，都是CRISPR在体液上运用的庞大身心。

近几年，CRISPR等位基因校对医学下半年开展，一些医学也显露出了良好的功效。这表明，CRISPR等位基因校对在体液上的运用已从未不可逾越的身心，我们无需花钱的就是解决这些已辨认出的缺陷，为工业发展出公共安全都和理论上的人类等位基因校对医学运用方案而奋斗。

参考文献：

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